基因工程
第8章 基因治疗一.判断题
1基因治疗的途径包括体外法和体内法
正确答案： √
2
基因治疗体外法多环节把控，相对风险较小 。被改造基因的细胞能在体外分离、培养、增殖，则优先选择体外法。
正确答案： √
3
人类胚胎的基因编辑应该区分疾病治疗型目的和性状增强型目的，两者从法律及伦理上都是允许的。
正确答案： ×
4
基因增补是把目的基因导入病变细胞，而缺陷基因仍然存在于细胞内，是目前基因治疗多采用的方式。
正确答案： √
作业标题：第7章 基因工程在基因功能研究中的应用 作业返回
一.单选题
1
转座子是一类可以改变其自身基因组位置的遗传因子,其( )序列含有两种转座必需的成分,即位于DNA序列两个末端的( )和位于序列中间的( )。
A、DNA 转座酶基因 转座序列
B、DNA 转座序列 转座酶基因
C、RNA 转座酶基因 转座序列
D、RNA 转座序列 转座酶基因
正确答案： B
2
锌指核酶是一类能特异剪切基因组某段DNA的人工合成的( ),包括( )和( )两个结构域。
A、核酸外切酶 DNA结合结构域 催化结构域
B、核酶 蛋白质结合结构域 催化结构域
C、核酸内切酶 DNA结合结构域 催化结构域
D、核酸内切酶 RNA结合结构域 催化结构域
正确答案： C
3
1个Cys2His2锌指蛋白识别( )bp的靶DNA片段,3个串联的锌指蛋白构成( ),识别特异的9bp靶DNA序列。 Fok Ⅰ 核酶催化结构域必须形成( )才能发挥作用。
A、1 催化结构域 同二聚体
B、1 DNA结合结构域 同二聚体
C、3 催化结构域 异二聚体
D、3 DNA结合结构域 异二聚体
正确答案： D
4
TALEN的DNA特异性识别与结合结构域由高度保守的TALE模块同源重复序列组成,每个TALE重复序列对应识别( )个碱基。重复序列含有33~35个氨基酸,其中第( )位的氨基酸为重复序列可变的双氨基酸残基( ),决定TALE识别的碱基。
A、1 12和13 位 RVD
B、1 12和13 位 DVD
C、3 12和13 位 RVD
D、3 12和13 位 DVD
正确答案： A
5
一个TALE模块只识别1个碱基,理论上只要有( )个模块就可以识别DNA的任意一种序列,而锌指蛋白识别3个碱基,则需要( )个锌指蛋白才可以识别所有的DNA序列。
A、4 61
B、4 64
C、5 61
D、5 64
正确答案： B
6
被誉为“打靶神器”的基因编辑技术为?
A、条件基因敲除技术
B、锌指核酶基因敲除技术
C、TALEN基因编辑技术
D、CRISPR基因编辑技术
正确答案： D
7
CRISPR/cas9打靶技术,只需合成一个( )就能实现对基因的特异性修饰,Cas蛋白( )。
A、crRNA 不具特异性
B、crRNA 具特异性
C、sgRNA 不具特异性
D、sgRNA 具特异性
正确答案： C
8
( )与mRNA同序列,( )与mRNA互补。
A、反义RNA,反义RNA
B、反义RNA 正义RNA
C、正义RNA,反义RNA
D、正义RNA,正义RNA
正确答案： C
9
RNA干扰是指通过反义RNA与正义RNA形成的( ),诱导内源靶基因的( )降解,达到阻止基因表达的目的。
A、双链RNA mRNA
B、双链DNA mRNA
C、双链RNA DNA
D、双链DNA DNA
正确答案： A
二.多选题
10下列哪些是基因编辑技术()
A、ZFN
B、TALEN
C、RNAi
D、CRISPR
正确答案： ABD
三.判断题
11转座子插入一个功能基因,可能引起该基因失活而失去正常的功能,因此,转座子的活跃转位可被用作基因诱变的手段。
正确答案： √
12化学诱变和转座子诱变属于“反向遗传学” 策略。
正确答案： ×
13基因敲除,又叫基因打靶技术。
正确答案： √
14识别同样长度的靶基因序列的ZFN实际上比TALEN大三倍。
正确答案： ×
作业标题：第6章 阳性转化子的鉴定 作业返回
一.单选题
1
卡那霉素抗性基因表示方法
A、Ampr
B、Kanr
C、Amps
D、Kans
正确答案： B
2
如下情况,如何确定重组子
A、
在氨苄培养基和四环素培养基上均能生长
B、
在氨苄培养基上不能生长,在四环素培养基上能生长
C、
在氨苄培养基上能生长,在四环素培养基上不能生长
D、
ori无法判断
正确答案： C
3
采用如下载体构建重组载体,酶切位点为EcoR V和BamH I。则可以用何种抗生素筛选转化子?
}
A、
Tet
B、
Amp
C、
ori
D、
ClaI
正确答案： B
4
蓝白斑筛选中,重组子菌落的颜色是?
A、蓝色
B、白色
C、红色
D、黄色
正确答案： B
5
{重组载体选择HindIII及BamH I酶切,得到的条带大小为?}
A、3.23kb+1.13kb
B、3.63kb+0.98kb+0.6kb+0.35kb
C、3.23kb+1.13kb+1.00kb+0.2kb
D、3.58kb+0.8kb+0.78kb+0.4kb
正确答案： B
6
采用双酶切电泳鉴定阳性转化子,如下载体,选择Pst I和Sac I 两个酶切位点,对于空载体和重组载体,在凝胶电泳上会出现的条带为?
A、
空载体:4700 bp;重组载体:4700 bp
B、
空载体:4700 bp;重组载体:6100 bp
C、
空载体:4700 bp;重组载体:4700bp + 1400 bp
D、
空载体:4700bp + 1400 bp;重组载体:6100 bp
正确答案： C
7
用于检测DNA的方法是?
A、Southern blot
B、Northern blot
C、Western blot
D、Eastern blot
正确答案： A
8
Sanger双脱氧末端终止法测序结果如图,胶上读出测序结果:
A、
3’-CGAAGTCA-5’
B、
5’-CGAAGTCA-3’
C、
3’-ACTGAAGC-5’
D、
5’-ACTGAAGC-3’
正确答案： B
9
化学法测序测序结果如图,则用于测序的模板的序列应为:
A、
5’-CAGTATCAGC-3’
B、
5’-CGACTATGAC-3’
C、
5’-TGACGCTGAT-3’
D、
5’-TAGTCGCAGT-3’
正确答案： D
二.判断题（共3题,）
10由于转化时重组DNA分子数量远大于受体细胞的数量,因而每个受体细胞均能接纳重组DNA分子。
正确答案： ×
11利用目的基因内部酶切位点电泳检测不仅考虑了目的基因和载体的分子量大小,也同时考虑了目的基因序列的特异性。
正确答案： √
12蓝白斑筛选不需要在培养基中加入相应的抗生素。
正确答案： ×
第5章 目的基因导入受体细胞的方法 作业
姓名： 班级：23上22级酿酒工程专升本 成绩： 8分
一.单选题（共6题,1）
1
制备多莉绵羊的技术中,外源DNA进入细胞的方式为?
A、逆转录病毒载体法
B、显微注射法
C、体细胞核移植法
D、脂质体介导法
答案：C
2
外源DNA被噬菌体携带并被注入细菌细胞的过程称为?
A、转染
B、转导
C、转化
D、接合
答案：A
3
关于Ca2+ 诱导的大肠杆菌转化法说法错误的是
A、通常选择稳定期的细菌制作感受态
B、关键步骤是42℃短暂热激和立即冰浴
C、短暂42℃热激处理是为了增加膜通透性
D、转化过程中有可能感染杂菌,导致假阳性转化子的出现
答案：C
4
Ti质粒衍生的双元载体系统,其中,目的基因位于( )上,( )质粒位于农杆菌中。
A、Vir基因协助质粒 Ti质粒穿梭质粒
B、Ti质粒穿梭质粒 Ti质粒穿梭质粒
C、Ti质粒穿梭质粒 Vir基因协助质粒
D、Vir基因协助质粒 Vir基因协助质粒
答案：C
5
农杆菌感染植物细胞时,帮助T-DNA转移的区域是?
A、结合转移区
B、复制起始区
C、毒性区(Vir区)
D、转移DNA区(T-DNA区)
答案：C
6
农杆菌感染植物细胞时,从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA是?
A、毒性区(Vir区)
B、结合转移区
C、转移DNA区(T-DNA区)
D、复制起始区
答案：C
二.多选题
1
外源目的基因进入大肠杆菌细胞的方法有
A、显微注射法
B、Ca2+ 诱导
C、电穿孔
D、噬菌体转导
答案：A
三.判断题
1
转基因植物仅指体细胞中含有外源目的基因的植物个体。
答案：√
第4章 目的基因的获取与制备 作业
姓名： 班级：23上22级酿酒工程专升本 成绩： 22.5分
一.单选题（共5题,1）
1
在一个反应体系中使用一对以上引物对同一模板DNA进行扩增的PCR称为?
A、巢式PCR
B、实时荧光定量PCR
C、多重PCR
D、不对称PCR
答案：C
2
反转录PCR的模板是( ),所需酶为( )。
A、RNA 逆转录酶
B、DNA 逆转录酶
C、DNA RNA聚合酶
D、RNA RNA聚合酶
答案：A
3
基因组文库的构建过程:①体外包装及基因组DNA文库的扩增;②重组DNA的筛选和鉴定; ③载体与基因组大片段DNA的连接;④细胞染色体大分子DNA的提取和大片段DNA的制备;⑤载体DNA的准备。
A、① ④ ⑤ ② ③
B、④ ⑤ ③ ① ②
C、① ④ ⑤ ③ ②
D、④ ⑤ ① ③ ②
答案：D
4
( )文库:将生物某一组织细胞中的全部( )分离出来作为模板,在体外用( )合成与之互补的cDNA第一条链,再在( )的作用下合成cDNA的第二条链。然后将双链cDNA分子连接到合适的载体上,转入到宿主细胞后形成的克隆的集合体。
A、cDNA mRNA 反转录酶 DNA聚合酶Ⅰ
B、cDNA mRNA DNA聚合酶Ⅰ 反转录酶
C、cDNA DNA 反转录酶 DNA聚合酶Ⅰ
D、基因组 mRNA 反转录酶 DNA聚合酶Ⅰ
答案：A
5
cDNA 文库的构建过程: ① cDNA第一链的合成;②细胞总 RNA 的提取和 mRNA 的分离;③ 双链 cDNA 克隆进质粒或噬菌体载体并导入宿主细胞中繁殖;④ cDNA第二链的合成。
A、② ③ ① ④
B、② ① ④ ③
C、① ④ ② ③
D、① ④ ③ ②
答案：B
二.多选题（共6题,18.0分）
1
以下哪些选项为PCR反应体系的成分?
A、热稳定DNA聚合酶
B、维持pH的缓冲液
C、脱氧核糖核苷酸
D、引物
E、脱氧三磷酸核苷(dNTP)
F、模板DNA
答案：ADEF
2
以下哪些方法是随机引入突变的方法?
A、重叠延伸PCR
B、易错PCR
C、DNA改组
D、体外随机引发重组
答案：BCD
3
新冠病毒核酸检测涉及到的PCR类型有哪些?
A、反向PCR
B、逆转录PCR
C、巢式PCR
D、实时荧光定量PCR
答案：BD
4
以下荧光标记方式特异性较强的是
A、EB
B、水解探针(TaqMan探针)
C、发夹型杂交探针
D、SYBR荧光染料
答案：BD
5
PCR循环步骤包括?
A、预变性
B、低温复性
C、高温变性
D、子链延伸
E、Hold 4℃
答案：ABD
6
关于Dpn I 酶说法正确的是?
A、Dpn Ⅰ只能切割未甲基化的GATC序列
B、Dpn Ⅰ只能切割甲基化了GATC序列
C、用Dpn Ⅰ酶切消化,模板链将会被消化掉
D、用Dpn Ⅰ酶切消化,新合成的链将会被消化掉
答案：BC
三.判断题
1蛋白质改造是通过改造基因序列实现的。
答案：√
2cDNA是互补于mRNA的DNA分子。
答案：√
3
易错PCR突变率越高越有利于发现有用的突变株。
答案：√
4
目前体外随机引入突变主要是利用Taq DNA聚合酶不具有3'→5'校对功能而引入突变。
答案：√
5
PCR ,Polymerase Chain Reaction, 即聚合酶链式反应,可特异扩增目的基因和目的DNA。
答案：×
6
基因文库是人工构建的某一物种的全部DNA的集合体。
答案：√
第3章 基因工程载体 作业
一.单选题（共4题,8.0分）
1
关于T7启动子表达系统说法错误的是
A、载体上待表达基因上游必须带有T7启动子
B、宿主细胞中必须有T7噬菌体RNA聚合酶
C、不可用IPTG进行诱导
D、只有T7 RNA聚合酶才能使其启动
答案：D
2
乳糖操作子中,阻遏蛋白的作用是?
A、阻止结构基因转录
B、诱导结构基因转录
C、阻止调节基因转录
D、激活结构基因转录
答案：A
3
载体上一段短的DNA序列,集中包含了多种单一限制性核酸酶的识别位点,称为?
A、多克隆位点(MCS)
B、氨苄青霉素抗性(Ampr)
C、复制起始点(ori)
D、β-半乳糖苷酶筛选系统
答案：D
4
λ噬菌体基因组可被包装蛋白识别的位点是
A、cos序列
B、A~J
C、N~R
D、J~N
答案：A
二.多选题
1
克隆载体基本骨架基础上增加表达元件就构成了表达载体,以下哪些选项为表达元件
A、SD序列
B、启动子
C、MCS
D、终止子
答案：BD
2
克隆载体必备的元件有哪些？
A、核糖体识别和结合位点
B、复制起点或完整的复制子结构
C、标记基因
D、多克隆位点
答案：ABCD
三.判断题
1
融合表达系统的具有易于目的蛋白分离和纯化、帮助目的蛋白形成正确的空间结构等优点。
答案：√
2
人工染色体载体是利用真核生物染色体或原核生物基因组的功能元件构建的能克隆50kb以上DNA片段的人工载体。
答案：×
3
T7启动子具有高度的特异性，只有T7 RNA聚合酶才能使其启动。
答案：√
4
启动子本身也会被转录。
答案：√
5
无论是克隆载体还是表达载体,都可将外源DNA或目的基因运载进入宿主细胞。
答案：×
6
SD是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合,并起始RNA合成的序列。
答案：√
7
黏粒是人工构建而成的一类特殊的质粒载体,带有黏端位点(cos),具有感染率高,装载容量大( 30-45kb ),稳定遗传等优点 。
答案：√
8
以λ噬菌体为基础构建载体有插入型载体和替换型载体,替换型载体仅一个多克隆位点,只能插入较小的外源DNA片段(小于10kb),插入型载体两个多克隆位点,能克隆较大的外源DNA片段(20-25kb)。
答案：√
作业标题：第2章 基因工程工具酶作业返回
一.单选题
1
能够识别双链DNA分子中特异的序列,并在识别序列内部或两侧特异切割双链DNA分子的酶叫什么酶?
A、DNA聚合酶
B、DNA连接酶
C、限制性核酸内切酶
D、碱性磷酸酶
正确答案：
2
在基因工程中广泛应用的是哪种类型的限制性核酸内切酶?
A、I型
B、II型
C、III型
D、Ⅳ型
正确答案：
3
在Haemophilus influenzae Rd菌株中发现的第三个II型的限制性核酸内切酶命名?
A、Hind II
B、hind II
C、Hind III
D、Hin III
正确答案：
4
DNA连接酶连接键为?
A、氢键
B、范德华力
C、磷酸二酯键
D、疏水作用
正确答案：
5
在DNA合成中识别错配的碱基并将它切除的活性是?
A、5′ → 3′ DNA聚合酶活性
B、3′ → 5′ DNA聚合酶活性
C、5′ → 3′ 核酸外切酶活性
D、3′ → 5′核酸外切酶活性
正确答案：
6催化去除DNA分子、RNA分子和脱氧核糖核苷三磷酸的5'端磷酸基团,使DNA或RNA分子的5'-P变成5'-OH的酶是?
A、T4多核苷酸激酶
B、重组酶
C、碱性磷酸酶
D、末端脱氧核苷酸转移酶
正确答案：
7
关于末端脱氧核苷酸转移酶的叙述错误的是?
A、本质为不需要DNA模板的DNA聚合酶
B、在一定条件下,沿着5′ - 3′方向将dNTPs加到3′-OH末端
C、底物必须有一定长度,至少是3个碱基以上的寡核苷酸
D、催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA的5′-OH末端
正确答案：
二.多选题
8II型限制性核酸内切酶的特征有哪些?()
A、每一种酶都有各自特异的识别序列
B、每一种Ⅱ型限制性核酸内切酶都在识别序列内或两侧特异位点切割
C、限制性核酸内切酶识别序列具有180°旋转对称的回文结构
D、识别序列的碱基对数量与识别位点在DNA上出现的频率一定是成反比的
正确答案：
9以下哪两种酶联用可以获得5'末端磷酸基团标记的探针?()
A、S1核酸酶
B、碱性磷酸酶
C、末端脱氧核苷酸转移酶
D、T4多核苷酸激酶
正确答案：
三.判断题
10Klenow大片段酶为DNA聚合酶,保留5′→3′的DNA聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性。
正确答案：
11Taq酶具有5′→3′ DNA聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,不具有3′→5′外切酶活性,缺乏错配碱基修复的能力。
正确答案：
12为了防止载体自连、目的基因自连,在连接反应之前载体和目的基因都需要用碱性磷酸酶处理。
正确答案：
13DNA聚合酶可催化双链DNA分子中具有邻近位置的3`-羟基与5`-磷酸基团之间形成磷酸二酯键。
正确答案：
作业标题：第1章 基因工程概述作业返回
一.单选题
1组成DNA的基本单位是什么
A、氨基酸
B、脱氧核苷酸
C、碱基
D、核糖核苷酸
正确答案：
2多个核苷酸通过( )键相连,形成核酸
A、氢键
B、3´,5´磷酸二酯键
C、范德华力
D、疏水键
正确答案：
3基因工程的基本流程:① 重组DNA分子导入到受体细胞;② 外源目的基因的表达;③ 目的基因与载体连接构建成为重组载体分子;④ 目的基因的分离、获取与制备;⑤ 外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选。
A、③ ④ ① ⑤ ②
B、④ ③ ① ⑤ ②
C、④ ③ ① ② ⑤
D、⑤ ④ ③ ① ②
正确答案：
二.多选题
4基因工程技术三大基本元件()
A、供体基因
B、载体
C、工具酶
D、受体细胞
正确答案：
三.判断题
5基因是染色体上的一段含有特定遗传信息的DNA。
正确答案：
6广义的基因工程不仅包括把外源基因“转入”生物,也包括把生物的内源基因进行修饰和剔除。
正确答案：
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